Apresentação
O Laboratório Multiusuário de Citometria de Fluxo (LMU-CF) do Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas (NUPEB/UFOP) é uma plataforma de acesso aberto que disponibiliza citômetros de fluxo e software de análise a projetos de pesquisa que utilizam citometria.
A plataforma atende demandas de imunologia, biologia celular e molecular, bioquímica, biotecnologia, patologia, parasitologia, microbiologia, genética, fisiologia e farmacologia, com aplicações em amostras humanas, animais e culturas celulares.
Histórico
A criação da plataforma remonta a 2005, quando o NUPEB aprovou projeto no edital CT-INFRA/FINEP que viabilizou a aquisição do primeiro citômetro de fluxo da UFOP o FACSCalibur (BD), destinado a atender demandas científicas transversais da Universidade.
Fig. 1 Citômetro de fluxo BD FACSCalibur
Em 2014, com a inauguração da sede própria do NUPEB e a estruturação de espaços dedicados às plataformas multiusuárias, o LMU-CF passou a contar com a designação de responsável técnico farmacêutico concursado.
Em 2015, via edital CT-INFRA/FINEP 2013, incorporou-se o segundo citômetro LSRFortessa (BD), ampliando substancialmente a capacidade de análise multiparamétrica.
Fig. 2 Citômetro de fluxo BD LSRFortessa
Em 2026, nova etapa de expansão, com a aquisição de dois equipamentos Beckman Coulter: CytoFLEX S e CytoFLEX SRT, incorporando ao LMU-CF a capacidade de triagem e separação celular por citometria (cell sorting), viabilizada por edital 02/2024 FAPEMIG.
Fig.3 Citômetros de fluxo Beckman Coulter CytoFLEX S (a esquerda) e CytoFLEX SRT (a direita)
Ao longo dessa trajetória, o LMU-CF consolida-se como plataforma de referência, atendendo pesquisadores, estudantes de pós-graduação, usuários externos de outras instituições e empresas.
Escopo do atendimento
O LMU-CF disponibiliza os citômetros de fluxo e o acesso a software de análise para uso dos pesquisadores, com apoio técnico especializado nas etapas experimentais realizadas na plataforma: configuração dos equipamentos, execução da aquisição das amostras e acesso ao software de análise, incluindo orientação sobre seu funcionamento.
O atendimento é estruturado para que o pesquisador conduza a etapa experimental em seu laboratório de origem e utilize a plataforma para a leitura das amostras já preparadas, com controles definidos. A equipe técnica está disponível para discutir previamente aspectos de compatibilidade entre o desenho experimental e as configurações disponíveis nos equipamentos.
Tipos de ensaio já atendidos na plataforma
A plataforma já executou aquisições para uma ampla gama de ensaios, entre eles:
- Imunofenotipagem de populações celulares em suspensão (sangue periférico, órgãos linfoides, tumores dissociados, culturas primárias e linhagens);
- Detecção de citocinas intracelulares;
- Quantificação de citocinas e proteínas solúveis em sobrenadante, plasma e soro por Cytometric Bead Array (CBA) e ensaios multiplex baseados em microesferas;
- Análise de ativação e proliferação celular;
- Ensaios de morte celular: apoptose (Anexina V/7-AAD, caspases), necrose e viabilidade;
- Sinalização intracelular: fluxo de cálcio, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e nitrogênio (RNS), potencial de membrana mitocondrial;
- Análise de ciclo celular e quantificação de DNA;
- Triagem e separação celular (cell sorting) para aplicações downstream (cultivo, sequenciamento, ensaios funcionais).
Demais ensaios podem ser avaliados caso a caso, conforme as configurações dos equipamentos e suas capacidades, mediante contato prévio com a responsável técnica.
Infraestrutura
A plataforma dispõe atualmente de quatro citômetros de fluxo, contemplando análise multiparamétrica de baixa a alta complexidade e separação celular:
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Equipamento |
Fabricante |
Configuração |
Aplicação principal |
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FACSCalibur |
BD Biosciences |
2 lasers — Azul (488 nm) e Vermelho (635 nm); 4 canais de fluorescência (FL1–FL4) |
Ensaios de rotina; imunofenotipagem básica |
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LSRFortessa |
BD Biosciences |
4 lasers — Azul (488 nm), Vermelho (640 nm), Violeta (405 nm) e Yellow-green (561 nm). |
Painéis multiparamétricos complexos; ensaios funcionais |
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CytoFLEX S |
Beckman Coulter |
4 lasers — Azul (488 nm), Vermelho (638 nm), Violeta (405 nm) e Yellow-green (561 nm); 13 canais de fluorescência. |
Análise de amostras nanométricas, vesículas extracelulares e partículas de baixa fluorescência |
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CytoFLEX SRT |
Beckman Coulter |
3 lasers — Azul (488 nm), Vermelho (638 nm) e Violeta (405 nm); 10 canais de fluorescência. |
Triagem e separação celular (cell sorting) de alta pureza |
Agendamento e uso da plataforma
O acesso aos equipamentos é feito exclusivamente por agendamento prévio, através do Portal Minha UFOP .
Fluxo de utilização (clique aqui para versão com imagens):
- Acessar ao Minha UFOP, área de Pesquisa e Pós-graduação, item Sistema de Reservas Multiusuário;
- Realize o cadastro da proposta de pesquisa junto à plataforma;
- Após autorização da proposta, realize o agendamento do equipamento;
- Realize o agendamento com no mínimo 48h de antecedência. Indique o equipamento, data e no campo de observações a natureza do ensaio e número de amostras;
- Comparecimento no horário agendado com as amostras prontas para leitura. Em caso de atrasos favor comunicar para não correr o risco de cancelamento do agendamento;
- Aquisição de dados após a leitura;
- Acesso ao software de análise disponibilizado pela plataforma, para uso pelo pesquisador por até 15 ou conforme demanda.
Usuários externos a UFOP devem entrar em contato com o Núcleo de Tecnologia da Informação (NTI) para realizarem cadastro e terem acesso ao agendamento via Minha UFOP.
Usuários do Minha UFOP cujo acesso a “Pesquisa e Pós-graduação” ou o “Sistema de Reserva de Equipamentos Multiusuário” esteja indisponível, devem contactar o NTI para correções no acesso.
Importante: Cada projeto distinto deve ter seu cadastro individual de proposta realizado.
Equipe
Prof. Dr. Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar Soares
Coordenador do Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas
Drª. Nívia Carolina Nogueira de Paiva
Vice-Coordenadora do Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas
Prof. Dr. Alexandre Barbosa Reis
Chefia do LMU-CF/NUPEB
Drª. Fernanda Karoline V. S. Torchelsen
Farmacêutica Responsável Técnica do LMU-CF
Colaboradores:
Prof. Dr. Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar Soares
Prof. Dr. Bruno Mendes Roatt
Dra. Thais Lopes V de Paschoale Ostolin
Serviços oferecidos pela plataforma
- Configuração dos equipamentos e ajuste de parâmetros de aquisição conforme o painel/ensaio;
- Execução da aquisição (leitura) das amostras nos citômetros de fluxo da plataforma;
- Acesso ao software de análise de dados;
- Orientação sobre o uso do software de análise;
- Treinamento de usuários para operação assistida (avaliação caso a caso);
Ainda não estão contemplados nos serviços da plataforma: Etapas de preparo de amostras e controles, execução de marcações, análise dos dados brutos, elaboração de painéis experimentais e interpretação de resultados.
Contato
Responsável Técnica: Drª. Fernanda Karoline V. S. Torchelsen
Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas — Bloco I, 3º andar
Agendamentos: Portal minha.ufop
Apoio financeiro
UFOP · CAPES · CNPq · FAPEMIG· FINEP ·
Projetos que viabilizaram a infraestrutura atual:
- Edital CT-INFRA/FINEP 2005 — aquisição do FACSCalibur;
- Edital CT-INFRA/FINEP 2013 — aquisição do LSRFortessa;
- FAPEMIG — Edital 003/2019 — Programa de Apoio a Instalações Multiusuárias (Processo CBB-APQ-00838-19);
- FAPEMIG — Edital 002/2022 — Programa de Apoio a Instalações Multiusuárias (Processo APQ-02494-22);
- FAPEMIG — Edital 02/2024 — Programa de Apoio a Instalações Multiusuárias (Processo APQ-02961-24) — aquisição do CytoFLEX S e CytoFLEX SRT.